高效液相色譜儀的三大保養(yǎng)要點

和其它分析儀器一樣，若想讓高效液相色譜儀很好地為你工作，首先要保養(yǎng)好它，總結保養(yǎng)的三要點：脫氣、過濾和沖洗。

一、脫氣

流動相脫氣對于避免HPLC系統(tǒng)出問題、順利得到一個理想的數(shù)據(jù)是一個很有效的措施。常用的脫氣方法有如下幾種：

1、吹氦脫氣法：

利用氦氣在液體中溶解度比空氣低的特性，在0.1MPa壓力下，以約60 mL/min流速通入流動相儲液容器中10～15min，可以很有效地從流動相中排除溶解的空氣，能排除接近80%的氧氣。

2、加熱回流法：

此法的脫氣效果較好。在操作時要注意冷凝塔的冷卻效率，否則溶劑會丟失，混合流動相的比例會有變化。

3、抽真空脫氣法：

此法可使用真空泵，降壓至0.05～0.07MPa即可除去溶解的氣體。但是由于真空脫氣會使混合溶劑組成發(fā)生變化，從而影響到實驗的重現(xiàn)性，因此多用于單溶劑體系的簡單分析。

4、在線脫氣法：

現(xiàn)在商品的HPLC儀器，均可配在線脫氣機，在線脫氣使用簡單，低故障，有效。

二、過濾

任何顆粒物進入HPLC系統(tǒng)后都會在柱子入口端被篩板擋住，最后的結果是將柱子堵塞，表現(xiàn)出的特征是系統(tǒng)壓力增加并使色譜峰變形。因此，要采取各種預防措施，努力防止或減少顆粒物進入HPLC系統(tǒng)中，從而延長儀器和色譜柱的使用壽命，并提高數(shù)據(jù)的可靠性。

三、沖洗

使HPLC系統(tǒng)良好運行的第三個要點是保持系統(tǒng)的清潔。以下幾個部位需要經(jīng)常沖洗。

1、流動相儲液瓶

首先要經(jīng)常清洗流動相儲液瓶，或者每做一批新樣品更換一次流動相。一個臟的儲液瓶將會污染注入的流動相。建議儲液瓶中緩沖液使用時間不要超過一周，而有機溶劑使用時間不要超過一個月。

2、泵

接下來要沖洗的是泵。千萬不要一分析完沖幾分鐘后就停泵，在停泵以前一定要用非緩沖液流動相沖洗泵在半個小時以上，要是流動相中有難揮發(fā)緩沖鹽則建議沖洗的時間應該更長些。

3、自動進樣器

自動進樣器也要按規(guī)定清洗?，F(xiàn)在的儀器多配有自動進樣器的沖洗液瓶，通常只要注意及時更換、補充沖洗液即可。

4、色譜柱 

對柱子的污染是隨使用時間而增加。用梯度沖洗效果更好，具體的比例要根據(jù)柱子的說明書和性質而定。

5、檢測器

如果是正常使用，檢測器將依據(jù)其性質并按照說明書規(guī)定進行洗。

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