要提高液相色譜的效率可從以下幾方面入手。以下介紹了幾種國際上流行的測量和計算柱效值的方法。

1、提高液相色譜柱柱效的方法

（1）降低移動相的流速，但會使分析時間延長。

（2）減少固定相的量，但色譜柱中樣品的負載量也隨之減小。

（3）減小固定相的顆粒度，但不能過分，過分后色譜柱的滲透率也會減小。

（4）選用低粘度的移動相，以利于快速傳質(zhì)，但卻不利于多組份分析。

（5）適當(dāng)提高柱溫，可降低移動相的粘度，但柱效和分離度也隨之降低。

（6）盡量減小停滯移動相的體積，但卻加快了移動相的流速。

從以上介紹可看出，在色譜分析過程中，各種因素是互相聯(lián)系和制約的。只有通過對柱效值的跟蹤測算，對自己分析方法不斷的研究和實踐，才能找到最佳的工作條件。

2、對柱效值進行跟蹤測算應(yīng)注意的問題

我們也應(yīng)記住柱效值并不足以預(yù)測在所有條件下的柱性能，對大多數(shù)色譜工作者來說，柱性能指的是色譜柱用于特定分離的能力，而僅僅有高柱效并不能保證這種分離能力。

不管用什么特定的測試方法，都會有幾個參數(shù)影響柱效的測定。這些參數(shù)包括：洗脫液的成分和粘度及其線流速，測定塔板數(shù)所用的溶質(zhì)、溫度、柱長、填料裝填方式、顆粒度，還有所選用的測量和計算方法。而測量和計算方法對柱效值的確定起著極大的作用。

3、幾種測量和計算柱效值的方法

因為色譜峰是假定樣品濃度在移動相和固定相中呈正態(tài)分布而得到的樣品譜帶分布,故常常把色譜峰型看作正態(tài)曲線來計算理論塔板數(shù)。因此計算柱效（以理論塔板數(shù)n為單位）的公式習(xí)慣上定義為：

式中tR為色譜峰的保留時間;σ2是以時間為單位測量色譜峰的偏差;a是和峰高（從測峰寬的基線量起）有關(guān)的常數(shù),ωb是峰寬,表示由色譜峰頂點與色譜峰兩側(cè)拐點處做切線與峰底基線相交兩點間的距離。

4、結(jié)論

假如一個色譜峰真是正態(tài)峰型，那么每種計算方法都會得到同樣的結(jié)果。然而即使一些比較理想的儀器和傾向于得到對稱峰型的溶質(zhì)，由于柱內(nèi)的槽或空隙，也會出現(xiàn)非正態(tài)峰型。所以不同的計算方法將會得到相差較大的n值。通常偏離正態(tài)模型的峰型表示為“前延”或“拖尾”。對于這些峰型，越在峰的高處測量，計算的理論塔板數(shù)值就越大（準(zhǔn)確性越低）。

在許多情況下，色譜工作者需要能反映整個峰型（包括拖尾）的柱效值,同時為了保證定量的重復(fù)性，也需要色譜峰很好的對稱性。這時對色譜峰非對稱性最敏感的計算方法最適合。如果目的僅僅是要監(jiān)測色譜柱從第一次使用到使用壽命結(jié)束這一過程中的柱效，那么以上任何一種方法都可以,應(yīng)選擇最簡便的方法。

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