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一、排氣不徹底。
在升壓前應將鍋內(nèi)冷空氣排凈,因空氣是熱不良導體,若不排凈,冷空氣就會聚集井滯留在滅菌鍋中消毒筒的中下部,圍繞在待滅菌物的周圍。在這種情況下,假若鍋內(nèi)僅排除一半空氣,當壓力表指針達到105Pa時,鍋內(nèi)實際溫度僅能達到 112℃,比要求的 121℃低9℃之多,將導致滅菌不徹底,可能造成大面積染菌。(自動的高壓滅菌鍋 上下排氣閥 都要打開 然后加熱 排空氣)
二、排氣軟管沒有按要求插入滅菌筒的下部,或排氣軟管斷裂、缺失。
滅菌鍋內(nèi)的冷空氣是通過排氣軟管排出的,上述情況將造成滅菌筒外的蒸汽直接經(jīng)排氣閥排出鍋外,滅菌鍋內(nèi)的空氣排放受阻。
三、消毒筒內(nèi)物品堆積太緊、太滿。
阻礙蒸汽的流通和熱交換,使容器內(nèi)升溫減慢,造成物體內(nèi)部殺菌不完全。
四、升溫過快。
滅菌的時間是以達到要求溫度后的持續(xù)時間計算的,但溫度的升降過程同樣起到殺菌的作用,升降溫度過快會通過影響總的積溫而影響滅菌效果。另外,升溫過快,特別是使用外源蒸汽的情況下,會造成被滅菌物體內(nèi)部升溫滯后于壓力表指示溫度。
五、滅菌的物體體積(容量)過大。
組織培養(yǎng)中或常規(guī)微生物實驗中,高溫蒸汽滅菌通常要在 121℃(即蒸汽壓力為1kg/cm2或 15磅/寸2,或0.105MPa)下保溫15min。這一規(guī)定僅適用于試管、三角瓶中小于200ml容量的。若體積太大,特別是固體培養(yǎng)基,會造成滅菌不徹底,應適當延長滅菌時間。
六、任意延長滅菌時間。
規(guī)定的滅菌溫度和時間是經(jīng)過科學試驗確定的,只要按照正確的滅菌程序是能達到滅菌目的的。但在實踐中常有人為了“保證徹底滅菌”而任意延長滅菌時間。這樣忽視了殺菌過程中溫度對培養(yǎng)基成分的破壞作用,是得不償失的。
七、溫度不穩(wěn)定。
滅菌過程中溫度(壓力)忽高忽低,特別是手提式電能滅菌鍋,它沒有控溫裝置,難于控溫。操作者可配置調(diào)壓變壓器,通過調(diào)節(jié)電壓控溫。此外,還常遇到滅菌鍋內(nèi)加水太少(應加 2~3L);容器內(nèi)裝的溶液量過多(應少于2/3);安全閥失靈等問題。
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