紫外分光光度計是實驗室常用的定性、定量儀器，是我們檢測及科研必不可少的設(shè)備，但是在使用的過程中，你真的你了解它嗎？

一、儀器的預(yù)熱問題

在一般分光光度計的使用說明書上，要求儀器預(yù)熱時間約20分鐘；若是帶微處理器的分光光度計，開機后儀器自動進(jìn)入自檢(初始化)狀態(tài)，約需10分鐘左右。

在分光光度計預(yù)熱這個環(huán)節(jié)上，很多使用者或多或少存在問題，如開機只預(yù)熱電路系統(tǒng)(不調(diào)節(jié)波長、打開吸收池暗箱蓋預(yù)熱等)或認(rèn)為初始化過程就是預(yù)熱等等。

對帶微處理器有自檢功能的分光光度計，開機后儀器自檢(初始化)結(jié)束后，在測定窗口上，設(shè)置所需波長值，用一個吸收池裝上純凈水置于光路上，調(diào)“0000A”后，預(yù)熱儀器，當(dāng)儀器顯示讀數(shù)不再變化后即可進(jìn)行測定。

對于紫外可見分光光度計，由于有雙光源(鎢燈與氘燈)，為了延長燈的使用壽命，開機自檢完成后可以關(guān)掉測定時不用的光源燈。

二、吸光度測定重復(fù)性的問題

分光光度計在測定過程中，發(fā)現(xiàn)同一個溶液在不同時間里其測定結(jié)果不同，即重復(fù)性不好，其原因是什么?排除測定錯誤因素外，可能原因有：

(1)儀器預(yù)熱時間不夠或預(yù)熱方法不對所造成，應(yīng)延長預(yù)熱時間或采用正確的預(yù)熱方法。

(2)光電轉(zhuǎn)換器(如光電管)因長時間使用其光電轉(zhuǎn)換 效率發(fā)生了變化導(dǎo)致。這時標(biāo)準(zhǔn)溶液與待測溶液的吸光度都 同樣變低，在相對定量時對結(jié)果影響很小。但是對這類儀器，一般建議連續(xù)使用時間不應(yīng)超過3h，若需長時間使用，最好間歇30min。

三、比色皿

樣品室的主要作用就是放置樣品，液體測試一般使用比色皿，比色皿分為石英和玻璃兩種，玻璃比色皿主要用于可見區(qū)（320nm-2500nm），在紫外區(qū)有吸收，不適用于紫外區(qū)，石英比色皿可以用于紫外可見近紅外區(qū)（190nm-2500nm），另外有些透明有機玻璃也可以用作吸收池。
1、如何區(qū)分比色皿

（1）比色皿上方通常會有字母標(biāo)識，各型號標(biāo)識稍有差別，玻璃比色皿口沿處有“G”(Glass玻璃)，而石英比色皿口沿處有“Q”(Quartz石英)或者“S”（Silicide石英玻璃）。

（2）使用紫外可見光分光光度計來鑒別玻璃、石英比色皿：現(xiàn)行國家檢定規(guī)程規(guī)定石英比色皿在250nm下吸光度應(yīng)小于0.07abs，若吸光度大于0.07abs則為玻璃比色皿。

2、如何配對比色皿使用需要配對的比色皿，在可適用的相同波長下，以空氣或者純水為介質(zhì)，使用透光率T進(jìn)行測量，將每組比色皿中的一只透射率調(diào)為100%，然后測量另外一只透光率，凡透射率之差不超過0.5%T，即可配對使用。

3、如何清洗比色皿比色皿是分析過程中對結(jié)果有很大影響的一個因素，比色皿污染之后對測試的影響更大，會使測試不穩(wěn)定甚至結(jié)果不準(zhǔn)，因此完成樣品測定之后，必須徹底清洗比色皿，下列清洗流程僅供參考：蒸餾水清洗——乙醇清洗——干燥。

如果比色皿被污染，請按照如下流程清洗：在洗滌劑中浸泡約10min（30-50℃）——蒸餾水清洗——再加有少量雙氧水的稀硝酸中浸泡約30min——蒸餾水清洗——干燥。（如果比色皿被有機物污染，請先用如丙酮等有機溶劑將有機物洗去并用蒸餾水清洗。）

值得注意的是，分析實驗常用的鉻酸洗液不宜用于比色皿洗滌，這是因為帶水的比色皿在該洗液中可能會產(chǎn)生熱量，致使比色皿膠接面裂開而損壞。同時經(jīng)洗液洗滌后的比色皿還可能殘存微量鉻(鉻在紫外區(qū)有吸收)，因此會影響實驗的測定。

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