多數(shù)細胞培養(yǎng)時需37 ℃、5 %CO₂ 張力和飽和濕度的生長條件, CO₂ 培養(yǎng)箱提供了細胞生長環(huán)境。目前國內(nèi)生物研究多數(shù)使用的是熱導型培養(yǎng)箱, 每臺4.5 萬～ 5 .5 萬元, 使用壽命10 年。從中南地區(qū)和我校報廢維修資料看, 平均使用壽命是6.5 年, 其主要原因是傳感器損壞。CO₂ 培養(yǎng)箱價格昂貴,我們期望它按期或過期服役, 為正確使用, 根據(jù)它的結(jié)構(gòu)和性能要求, 現(xiàn)介紹CO2培養(yǎng)箱的正確使用方法、常見故障的預防和處理。

1.溫度傳感器保護:培養(yǎng)箱溫度由溫度傳感器控制, 它的正常運行需要25 ℃室溫條件。常規(guī)使用時, 箱內(nèi)放1 ～ 2 支水銀溫度計作為溫度對照。溫度傳感器的正確運行, 使設定溫度數(shù)、箱面顯示數(shù)和箱內(nèi)溫度三者一致。當室溫高于30 ℃時, 溫度傳感器調(diào)節(jié)功能失靈, 出現(xiàn)箱面顯示溫度高于設定數(shù), CO₂ 培養(yǎng)箱內(nèi)溫度又高于箱面溫度, 并常伴隨警告聲。此現(xiàn)象發(fā)生在白天,降低室溫, 培養(yǎng)箱溫度恢復正常運行。若發(fā)生在晚上, 持續(xù)高溫使細胞死亡。為避免這一現(xiàn)象發(fā)生, 夏季使用培養(yǎng)箱時, 無菌室應保持25 ℃左右室溫。

2.氣體傳感器保護: CO₂ 培養(yǎng)箱內(nèi)氣壓由CO₂ 氣體傳感器控制。CO₂ 傳感器正常反饋要求進氣壓為0 .06 兆帕。開門后, 箱內(nèi)氣體丟失, CO₂ 壓力下降。關(guān)門后, CO₂ 傳感器在低壓刺激下有節(jié)奏地開閉, 向箱內(nèi)慢慢充氣, 當進氣壓達0 .06 兆帕時, 自動停止調(diào)節(jié)。換氣瓶時, 部分實驗者針對進氣壓, 采用加大進氣壓的快速充氣法, 使用0.1 兆帕甚至0 .2 兆鉑壓力, 無形中損傷了CO₂ 傳感器。開始這種損傷效應不能顯示, 實驗者不能察覺, 反復錯誤操作, CO₂ 傳感器損傷累積最終致命損壞, 使氣壓調(diào)節(jié)失靈。當實驗者發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基顏色變化異常、細胞生長緩慢時, 已無法挽救損壞。因此,正確的使用方法應該張貼在箱門, 使每個實驗者都會操作。為防止漏氣, 在氣瓶出口處填膠皮, 氣壓表接頭處纏封口帶, 氣瓶與氣壓表連接后, 利用肥皂水試驗, 接口無氣泡出現(xiàn)為連接合格。

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