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凝膠成像系統(tǒng)構(gòu)成及選型

2023-01-03 10:22:27 

凝膠成像系統(tǒng)構(gòu)成及選型

實(shí)驗(yàn)室常用到的凝膠成像系統(tǒng)的構(gòu)成有哪些呢?


認(rèn)識(shí)CCD

CCD是電荷耦合器件(Charge Coupled Device)的英文名稱縮寫,是一種光電轉(zhuǎn)換器件。是凝膠圖像系統(tǒng)的核心部件。

CCD又分為:制冷型和非制冷型,在曝光超過5-10秒,CCD芯片就會(huì)發(fā)熱,沒有致冷設(shè)備的芯片,“熱”或者白的像素點(diǎn)就會(huì)遮蓋圖像,圖像到處可見雪花。

衡量CCD好壞的指標(biāo):分辨率,CCD尺寸,動(dòng)態(tài)范圍,靈敏度,量子效率,信噪比等,CCD感光器件的面積越大,捕獲的光子越多,感光性能越好,信噪比越低 。

關(guān)鍵參數(shù)指標(biāo)

分辨率:和像素相關(guān),像素為CCD能分別的最小的感光元件 ,即為一個(gè)點(diǎn)。CCD與像素?cái)?shù)量和像素大小也有關(guān)。

動(dòng)態(tài)范圍值:動(dòng)態(tài)范圍表示在一個(gè)圖像中最亮與最暗的比值。灰階12(bit)表示在一種表征光亮度的方法 ,動(dòng)態(tài)范圍的值越高CCD性能越好。

量子效率:(CCD分為 商業(yè)及、工程級(jí)、科研及。)波長(zhǎng)越大效率越高。CCD的量子效率也稱像素靈敏度,指在一定的曝光量下,像素勢(shì)阱中所積累的電荷數(shù)與入射到像素表面上的光子數(shù)之比。

信噪比:化學(xué)發(fā)光檢測(cè)的時(shí)候,需要曝光的時(shí)間比較長(zhǎng),這樣導(dǎo)致CCD產(chǎn)生較多的暗電流,對(duì)圖像的質(zhì)量影響非常大。需要通過CCD降溫來減少影響

光學(xué)鏡頭:光學(xué)鏡頭從焦距上可分為短焦鏡頭、中焦鏡頭,長(zhǎng)焦鏡頭;從視場(chǎng)大小分有廣角、標(biāo)準(zhǔn),遠(yuǎn)攝鏡頭;結(jié)構(gòu)上分有固定光圈定焦鏡頭,手動(dòng)光圈定焦鏡頭,自動(dòng)光圈定焦鏡頭,手動(dòng)變焦鏡頭、自動(dòng)變焦鏡頭,自動(dòng)光圈電動(dòng)變焦鏡頭,電動(dòng)三可變(光圈、焦距、聚焦均可變)鏡頭等。

濾光鏡片:熒光:gelred、gelgreen、EB、TLC plates、GFP plates、SYBR Green、SYBR Gold、SYBR Safe、SYPRO Red、SYPRO Orange、Texas Red、Rhodamine Red、Fluorescein、Deep Purple、Cy2、Cy3、Cy3.5、Cy5、熒光板等

濾光輪

作用:濾掉不需要的光,只讓特定波長(zhǎng)的光透過。

DNA分子在紫外光下,會(huì)發(fā)出590nm左右的熒光。因此應(yīng)用F590濾光片,就會(huì)只讓DNA分子發(fā)出的光透過濾光片被相機(jī)檢測(cè)到。而紫外透照儀發(fā)出302nm UV不會(huì)被相機(jī)檢測(cè)到。

其他部分

不銹鋼暗室:抗化學(xué)腐蝕,密閉

透照臺(tái):一般是抽屜式透照臺(tái),方便進(jìn)行切膠(透射面積:Xcm X Ycm)

紫外自動(dòng)防護(hù)裝置:開門自動(dòng)關(guān)閉光源

光源:紫外透射和白光反射,可選配白光透射(紫外/白光轉(zhuǎn)換屏)

05如何選型

1、根據(jù)應(yīng)用范圍:選擇普通凝膠成像或高端應(yīng)用的化學(xué)發(fā)光和熒光系列成像系統(tǒng)

2、根據(jù)像素要求選擇:50萬,140萬,200萬,420萬等

3、根據(jù)暗箱類型選擇

4、根據(jù)紫外透射面積選擇

5、根據(jù)鏡頭類型選擇:手動(dòng)鏡頭,電動(dòng)鏡頭

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