1、在賽默飛色譜柱液相系統(tǒng)中加入在線過(guò)濾器

在線過(guò)濾器的內(nèi)部顆?？障兑话闶?.5微米，對(duì)于UHPLC會(huì)選擇0.2微米空隙的在線過(guò)濾器。這個(gè)空隙尺寸和柱頭的過(guò)濾篩板尺寸接近或者略小。所以，在線過(guò)濾器能夠有效的阻隔來(lái)自樣品、泵頭密封墊、自動(dòng)進(jìn)樣器的轉(zhuǎn)子密封墊的顆粒物，以防止柱頭過(guò)濾篩板的堵塞。注意：但是對(duì)于非常低死體積的液相系統(tǒng)，在線過(guò)濾器的加入可能會(huì)導(dǎo)致系統(tǒng)死體積增大峰展寬變嚴(yán)重的問(wèn)題。而對(duì)于大多數(shù)的液相系統(tǒng)而言，色譜圖不會(huì)有太大變化。

2、在賽默飛色譜柱前端使用保護(hù)柱

保護(hù)柱有很多種，通用型、一體式、卡套式，但是它其實(shí)是一個(gè)和分析柱固定相相同的10-20mm的小柱子。因?yàn)樗哂泻头治鲋嗤膬?nèi)部填料，所以保護(hù)柱不僅可以阻隔顆粒物，還可以阻隔易吸附的樣品基質(zhì)組分。注意：由于保護(hù)柱中可能有大量的強(qiáng)保留組分，在用強(qiáng)溶劑清洗系統(tǒng)時(shí)請(qǐng)取下保護(hù)柱，以防止這些強(qiáng)保留組分被洗脫進(jìn)分析柱。保護(hù)柱如果出現(xiàn)吸附飽和也可能會(huì)對(duì)分離效果有影響。

3、對(duì)樣品進(jìn)行凈化處理

有一些液相的分析方法沒(méi)有明確標(biāo)注樣品的凈化，但我希望大家在做分析時(shí)都能夠考慮樣品的凈化，常用的方案是對(duì)樣品進(jìn)行過(guò)濾。在實(shí)際工作中，賽默飛色譜柱的儲(chǔ)存也會(huì)影響柱子的使用壽命。

4、賽默飛色譜柱使用時(shí)注意事項(xiàng)：

為避免管路中的有機(jī)溶劑和氣泡進(jìn)入色譜柱，先用水沖洗整個(gè)色譜系統(tǒng)，然后才能接入凝膠柱。不要讓有機(jī)溶劑進(jìn)入柱中，否則會(huì)使填料脫水，導(dǎo)致柱床損壞，要小流速開(kāi)啟泵，不要快速加大流速，以防止壓力迅猛升高而導(dǎo)致柱床損壞。15mm的柱子流速不要超過(guò)3ml/min。每次使用后務(wù)必用蒸餾水沖洗干凈將含鹽的流動(dòng)相置換干凈，若較長(zhǎng)時(shí)間不用請(qǐng)按保存方法保存。

5、賽默飛色譜柱保存方法：

將凝膠柱用蒸餾水沖凈后充上0.02%-0.05%的疊氮鈉水溶液封存，或三氯丁醇苯基汞代鹽將色譜柱封閉后低溫保存(溫度在5℃左右)在冰箱。再次使用時(shí)，用蒸餾水將保護(hù)溶液沖洗掉即可使用。如果次日還要使用也要從系統(tǒng)中取下，將賽默飛色譜柱封閉后存于4~8度的冰箱中冷藏。

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