紫外分光光度計(jì)是實(shí)驗(yàn)室常用的定性、定量?jī)x器，是我們檢測(cè)及科研必不可少的設(shè)備，但是在使用的過(guò)程中，你真的你了解它嗎？

一、儀器的預(yù)熱問(wèn)題

在一般分光光度計(jì)的使用說(shuō)明書(shū)上，要求儀器預(yù)熱時(shí)間約20分鐘；若是帶微處理器的分光光度計(jì)，開(kāi)機(jī)后儀器自動(dòng)進(jìn)入自檢(初始化)狀態(tài)，約需10分鐘左右。

在分光光度計(jì)預(yù)熱這個(gè)環(huán)節(jié)上，很多使用者或多或少存在問(wèn)題，如開(kāi)機(jī)只預(yù)熱電路系統(tǒng)(不調(diào)節(jié)波長(zhǎng)、打開(kāi)吸收池暗箱蓋預(yù)熱等)或認(rèn)為初始化過(guò)程就是預(yù)熱等等。

對(duì)帶微處理器有自檢功能的分光光度計(jì)，開(kāi)機(jī)后儀器自檢(初始化)結(jié)束后，在測(cè)定窗口上，設(shè)置所需波長(zhǎng)值，用一個(gè)吸收池裝上純凈水置于光路上，調(diào)“0000A”后，預(yù)熱儀器，當(dāng)儀器顯示讀數(shù)不再變化后即可進(jìn)行測(cè)定。

對(duì)于紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，由于有雙光源(鎢燈與氘燈)，為了延長(zhǎng)燈的使用壽命，開(kāi)機(jī)自檢完成后可以關(guān)掉測(cè)定時(shí)不用的光源燈。

二、吸光度測(cè)定重復(fù)性的問(wèn)題

分光光度計(jì)在測(cè)定過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)同一個(gè)溶液在不同時(shí)間里其測(cè)定結(jié)果不同，即重復(fù)性不好，其原因是什么?排除測(cè)定錯(cuò)誤因素外，可能原因有：

(1)儀器預(yù)熱時(shí)間不夠或預(yù)熱方法不對(duì)所造成，應(yīng)延長(zhǎng)預(yù)熱時(shí)間或采用正確的預(yù)熱方法。

(2)光電轉(zhuǎn)換器(如光電管)因長(zhǎng)時(shí)間使用其光電轉(zhuǎn)換 效率發(fā)生了變化導(dǎo)致。這時(shí)標(biāo)準(zhǔn)溶液與待測(cè)溶液的吸光度都 同樣變低，在相對(duì)定量時(shí)對(duì)結(jié)果影響很小。但是對(duì)這類(lèi)儀器，一般建議連續(xù)使用時(shí)間不應(yīng)超過(guò)3h，若需長(zhǎng)時(shí)間使用，最好間歇30min。

三、比色皿

樣品室的主要作用就是放置樣品，液體測(cè)試一般使用比色皿，比色皿分為石英和玻璃兩種，玻璃比色皿主要用于可見(jiàn)區(qū)（320nm-2500nm），在紫外區(qū)有吸收，不適用于紫外區(qū)，石英比色皿可以用于紫外可見(jiàn)近紅外區(qū)（190nm-2500nm），另外有些透明有機(jī)玻璃也可以用作吸收池。
1、如何區(qū)分比色皿

（1）比色皿上方通常會(huì)有字母標(biāo)識(shí)，各型號(hào)標(biāo)識(shí)稍有差別，玻璃比色皿口沿處有“G”(Glass玻璃)，而石英比色皿口沿處有“Q”(Quartz石英)或者“S”（Silicide石英玻璃）。

（2）使用紫外可見(jiàn)光分光光度計(jì)來(lái)鑒別玻璃、石英比色皿：現(xiàn)行國(guó)家檢定規(guī)程規(guī)定石英比色皿在250nm下吸光度應(yīng)小于0.07abs，若吸光度大于0.07abs則為玻璃比色皿。

2、如何配對(duì)比色皿使用需要配對(duì)的比色皿，在可適用的相同波長(zhǎng)下，以空氣或者純水為介質(zhì)，使用透光率T進(jìn)行測(cè)量，將每組比色皿中的一只透射率調(diào)為100%，然后測(cè)量另外一只透光率，凡透射率之差不超過(guò)0.5%T，即可配對(duì)使用。

3、如何清洗比色皿比色皿是分析過(guò)程中對(duì)結(jié)果有很大影響的一個(gè)因素，比色皿污染之后對(duì)測(cè)試的影響更大，會(huì)使測(cè)試不穩(wěn)定甚至結(jié)果不準(zhǔn)，因此完成樣品測(cè)定之后，必須徹底清洗比色皿，下列清洗流程僅供參考：蒸餾水清洗——乙醇清洗——干燥。

如果比色皿被污染，請(qǐng)按照如下流程清洗：在洗滌劑中浸泡約10min（30-50℃）——蒸餾水清洗——再加有少量雙氧水的稀硝酸中浸泡約30min——蒸餾水清洗——干燥。（如果比色皿被有機(jī)物污染，請(qǐng)先用如丙酮等有機(jī)溶劑將有機(jī)物洗去并用蒸餾水清洗。）

值得注意的是，分析實(shí)驗(yàn)常用的鉻酸洗液不宜用于比色皿洗滌，這是因?yàn)閹谋壬笤谠撓匆褐锌赡軙?huì)產(chǎn)生熱量，致使比色皿膠接面裂開(kāi)而損壞。同時(shí)經(jīng)洗液洗滌后的比色皿還可能殘存微量鉻(鉻在紫外區(qū)有吸收)，因此會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的測(cè)定。

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